Orphelin, Peter Parker est élevé par sa tante May et son oncle Ben dans le quartier Queens de New York. Tout en poursuivant ses études à l'université, il trouve un emploi de photographe au journal Daily Bugle. Il partage son appartement avec Harry Osborn, son meilleur ami, et rêve de séduire la belle Mary Jane.
Cependant, après avoir été mordu par une araignée génétiquement modifiée, Peter voit son agilité et sa force s'accroître et se découvre des pouvoirs surnaturels. Devenu Spider-Man, il décide d'utiliser ses nouvelles capacités au service du bien.
Au même moment, le père de Harry, le richissime industriel Norman Osborn, est victime d'un accident chimique qui a démesurément augmenté ses facultés intellectuelles et sa force, mais l'a rendu fou. Il est devenu le Bouffon Vert, une créature démoniaque qui menace la ville. Entre lui et Spider-Man, une lutte sans merci s'engage.

Peter Parker / Spider-Man (Tobey Maguire) : A la fois photographe et super-héros
Norman Osborn / le Bouffon Vert (Willem Dafoe) : Fondateur de OSCORP
Mary Jane Watson (Kirsten Dunst) :  Camarade de classe de Peter et Harry
Harry Osborn (James Franco) : Ami de Peter
J. Jonah Jameson (J.K. Simmons) : Directeur du Daily Bugle
L'oncle Ben Parker (Cliff Robertson) : Oncle de Peter
La tante May (Rosemary Harris) : Tante de Peter
Présentateur de catch (Bruce Campbell) : Un présentateur de catch

Hoffman (Ted Raimi) : Assistant de M. Jameson

Sam Raimi, que l'on connait surtout pour ses films d'horreurs, nous surprend ici avec cette formidable adapation de l'homme araignée. Les mouvements et les actions de ce dernier sont magnifiquement retranscrites et on suit avec plaisir, les cabrioles de Spider-Man sauvant admirablement la ville de New York.